2023-09-27
摘要(yao)
本品為Tau、Glu、Gly、Val、Cysteine等(deng)5種氨(an)基酸(suan)配制而成的(de)(de)(de)透明膠質(zhi)(zhi)類物質(zhi)(zhi)，使(shi)用Biochrom30+全自動(dong)氨(an)基酸(suan)分(fen)(fen)析(xi)儀，對(dui)其所(suo)(suo)含的(de)(de)(de)游離氨(an)基酸(suan)組分(fen)(fen)及含量(liang)進行分(fen)(fen)析(xi)，并了解對(dui)該樣品高溫(wen)滅菌前(qian)后，所(suo)(suo)含氨(an)基酸(suan)的(de)(de)(de)具體(ti)影響。結果(guo)表明該未(wei)知樣中氨(an)基酸(suan)各單個氨(an)基酸(suan)含量(liang)的(de)(de)(de)濃度(du)，及高溫(wen)滅菌前(qian)后的(de)(de)(de)分(fen)(fen)別見附頁結果(guo)表。
大(da)(da)昌(chang)(chang)華(hua)(hua)(hua)嘉(jia)是一家專(zhuan)注于亞洲地區(qu)(qu)，在(zai)(zai)(zai)市(shi)(shi)場(chang)拓展(zhan)(zhan)服務(wu)領(ling)域處于領(ling)先地位的(de)集團(tuan)。大(da)(da)昌(chang)(chang)華(hua)(hua)(hua)嘉(jia)致(zhi)力于幫助其他(ta)公(gong)司(si)和品牌拓展(zhan)(zhan)在(zai)(zai)(zai)消(xiao)費品、醫藥保健、特(te)色(se)原(yuan)料、科技事業(ye)(ye)(ye)領(ling)域的(de)業(ye)(ye)(ye)務(wu)。大(da)(da)昌(chang)(chang)華(hua)(hua)(hua)嘉(jia)的(de)服務(wu)范圍包括采購、市(shi)(shi)場(chang)研究與分析、市(shi)(shi)場(chang)營銷(xiao)(xiao)與銷(xiao)(xiao)售、配(pei)送與物(wu)流以及售后服務(wu)。公(gong)司(si)在(zai)(zai)(zai)瑞(rui)士(shi)證券交易(yi)所上市(shi)(shi)，在(zai)(zai)(zai)全(quan)球(qiu)35個市(shi)(shi)場(chang)營運，擁有33,000名專(zhuan)業(ye)(ye)(ye)員工， 2018年(nian)(nian)銷(xiao)(xiao)售凈額為(wei)113億瑞(rui)士(shi)法(fa)郎(lang)。大(da)(da)昌(chang)(chang)華(hua)(hua)(hua)嘉(jia)于1865年(nian)(nian)成(cheng)立，憑借深厚的(de)瑞(rui)士(shi)傳統(tong)背景(jing)，公(gong)司(si)在(zai)(zai)(zai)亞洲開(kai)展(zhan)(zhan)業(ye)(ye)(ye)務(wu)歷史悠久， 深深植根于亞太地區(qu)(qu)的(de)社(she)會和企業(ye)(ye)(ye)界。大(da)(da)昌(chang)(chang)華(hua)(hua)(hua)嘉(jia)科技事業(ye)(ye)(ye)部專(zhuan)注于為(wei)特(te)定的(de)行(xing)業(ye)(ye)(ye)應用領(ling)域提供全(quan)面的(de)解決方案。2018年(nian)(nian)該業(ye)(ye)(ye)務(wu)單元擁有1,220名員工，凈銷(xiao)(xiao)售額為(wei)4.121億瑞(rui)士(shi)法(fa)郎(lang)。
大(da)昌(chang)華(hua)嘉(大(da)昌(chang)洋行（上海）有限公司(si))是一(yi)家專注于(yu)(yu)亞(ya)洲地(di)區，在市場拓(tuo)展(zhan)服務(wu)領域處于(yu)(yu)領先地(di)位的(de)集(ji)團。大(da)昌(chang)華(hua)嘉致力(li)于(yu)(yu)幫助(zhu)其(qi)他公司(si)和品(pin)牌拓(tuo)展(zhan)在消費(fei)品(pin)、醫(yi)藥保健、特(te)色(se)原(yuan)料、科技事業領域的(de)業務(wu)。大(da)昌(chang)華(hua)嘉于(yu)(yu)1865年(nian)成立，憑(ping)借深(shen)厚(hou)的(de)瑞士傳統背景(jing)，公司(si)在亞(ya)洲開(kai)展(zhan)業務(wu)歷史(shi)悠久，深(shen)深(shen)植根于(yu)(yu)亞(ya)太地(di)區的(de)社會和企業界。
大(da)昌(chang)華嘉儀器(qi)部專業(ye)(ye)(ye)提(ti)供分析(xi)儀器(qi)及設(she)(she)備，代理眾多(duo)歐美先進(jin)儀器(qi)，產品(pin)范圍包(bao)括：顆(ke)粒，物理，化學，生化，通用(yong)實驗室的(de)各類分析(xi)儀器(qi)以(yi)及流程儀表設(she)(she)備，在(zai)中國(guo)的(de)石化，化工，制藥，食品(pin)，飲(yin)料，農(nong)業(ye)(ye)(ye)科技等諸多(duo)領域擁有(you)大(da)量(liang)用(yong)戶(hu)，具有(you)良好的(de)市場聲譽。我(wo)們的(de)業(ye)(ye)(ye)務逐(zhu)年增加(jia)，市場不(bu)斷擴大(da)。大(da)昌(chang)華嘉公司在(zai)中國(guo)設(she)(she)有(you)多(duo)個銷售，服(fu)務網點，旨在(zai)為客(ke)戶(hu)提(ti)供全方位(wei)的(de)產品(pin)和服(fu)務。
一、樣品前處理
1、所用試劑
1.1 Loading Buffer：鋰鹽系(xi)統(tong)，pH 2.2
1.2 磺基水(shui)(shui)楊酸溶液：取50g磺基水(shui)(shui)楊酸溶于1L純水(shui)(shui)中
1.3 乙二(er)胺四乙酸二(er)鈉(na)溶(rong)液：取10g EDTA-Na溶(rong)于1L純水中
1.4 0.06mol/L 鹽(yan)酸：取50mL 鹽(yan)酸加水稀釋(shi)至10mL,混勻
1.5 5種氨基(ji)酸標準品、Cystine單標
2、前處理設備
1) 分析天平:精(jing)度為 0.0001g
2) 移液(ye)槍及槍頭
3) 0.22um濾膜
4) 一次性注射器
5) 低范圍pH試紙
3、樣品制備（參考NY/T 1975-2010）
因樣品(pin)為(wei)透(tou)明膠質類物質，且可能(neng)含有未知大分(fen)子等雜質，故需(參考NY/T 1975)進行除蛋(dan)白前處理：
吸取2 mL樣(yang)品于(yu)(yu)10 mL離(li)心(xin)管或試管中,準(zhun)確(que)加人2 mL磺基(ji)水楊酸(suan)溶(rong)液(ye)(ye)(1.2)，混勻(yun),放(fang)置1h。準(zhun)確(que)加入1 mL EDTA-Na溶(rong)液(ye)(ye)(1.3)和(he)1 mL鹽酸(suan)溶(rong)液(ye)(ye)(1.4),混勻(yun),離(li)心(xin)15 min(或用0.45um的(de)微孔濾(lv)膜過(guo)濾(lv))。吸取上清液(ye)(ye)(或濾(lv)液(ye)(ye))1 mL(測定當(dang)前pH，若有需要則可加少許的(de)Loading Buffer (1.1),使氨基(ji)酸(suan)濃度處(chu)于(yu)(yu)儀器檢測范圍內(nei))，移(yi)液(ye)(ye)槍取上述(shu)溶(rong)液(ye)(ye)1mL至一(yi)次(ci)性注射劑(ji)，過(guo)濾(lv)膜，上機待測。
二、分析方(fang)法(fa)描述(shu)（Biochrom 30+）
氨基酸(suan)分析(xi)儀分析(xi)方法參數：
1) 色譜(pu)柱：Biochrom Li型陽(yang)離(li)子交換樹脂柱，4.6*20cm
2) 分離程序：
3) 運(yun)行時(shi)間(jian)：經分(fen)析時(shi)間(jian)+再生時(shi)間(jian) 168.15min
4) 反應單元溫(wen)度：135°C。
5) 檢(jian)測波(bo)長：570nm、440nm同時檢(jian)測。
三、樣品中氨基酸含量的計算
樣品測定(ding)液(ye)氨基酸的含量按式(1)計算:
Ci = Cs/As × Ai× F ················· (1)式中:
Ci ———樣品測定液氨基酸i的含量,單位為納摩爾每毫升(nmol/mL);
Cs ———氨基酸標準工作液氨基酸s的含量,單位為納摩爾每毫升(nmol/mL);
Ai ———試樣測定液氨基酸i的峰面積;
As ———氨基酸標準工作液氨基酸s的峰面積;
F ———樣品稀釋倍數。
附：透明膠質類物質中，高溫滅菌前后比較的游離氨基酸，分析圖譜及做樣結果：
由結果可(ke)(ke)知(zhi)：高(gao)溫滅菌(jun)之后的(de)游離氨基酸(suan)含量，相較于滅菌(jun)前會(hui)(hui)有少(shao)許(xu)(xu)提升。這是由于滅菌(jun)前的(de)樣(yang)品中可(ke)(ke)能含有的(de)少(shao)許(xu)(xu)干擾物質(zhi)或雜菌(jun)，存在經過高(gao)溫滅菌(jun)等的(de)處理(li)會(hui)(hui)被破壞(huai)，釋放(fang)少(shao)許(xu)(xu)的(de)氨基酸(suan)的(de)可(ke)(ke)能，屬(shu)合理(li)正(zheng)常現象。
圖1. 樣品A--滅(mie)菌前(qian)—Tau、Glu、Gly、Val+Cystine
圖2. 樣品B--滅菌后—Tau、Glu、Gly、Val+Cystine
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