2023-09-27
摘要
本品為(wei)Tau、Glu、Gly、Val、Cysteine等5種(zhong)氨(an)基(ji)(ji)(ji)酸(suan)配制而成的(de)(de)(de)(de)透明膠質(zhi)類物質(zhi)，使(shi)用Biochrom30+全(quan)自動氨(an)基(ji)(ji)(ji)酸(suan)分析(xi)儀，對(dui)其所含(han)的(de)(de)(de)(de)游離氨(an)基(ji)(ji)(ji)酸(suan)組分及含(han)量進行分析(xi)，并了(le)解對(dui)該樣品高(gao)溫滅菌前(qian)后，所含(han)氨(an)基(ji)(ji)(ji)酸(suan)的(de)(de)(de)(de)具(ju)體(ti)影響。結果表(biao)明該未(wei)知(zhi)樣中氨(an)基(ji)(ji)(ji)酸(suan)各單個(ge)氨(an)基(ji)(ji)(ji)酸(suan)含(han)量的(de)(de)(de)(de)濃度(du)，及高(gao)溫滅菌前(qian)后的(de)(de)(de)(de)分別見附頁結果表(biao)。
大(da)昌(chang)(chang)華(hua)(hua)嘉是一家專注于亞(ya)洲地(di)(di)區，在(zai)市(shi)場(chang)拓展服(fu)務(wu)領域處于領先地(di)(di)位的(de)集(ji)團。大(da)昌(chang)(chang)華(hua)(hua)嘉致力于幫(bang)助其他公(gong)司(si)和品(pin)(pin)牌拓展在(zai)消費品(pin)(pin)、醫藥保健、特(te)色原料、科技事業(ye)(ye)領域的(de)業(ye)(ye)務(wu)。大(da)昌(chang)(chang)華(hua)(hua)嘉的(de)服(fu)務(wu)范圍包(bao)括采購(gou)、市(shi)場(chang)研究(jiu)與(yu)分析、市(shi)場(chang)營(ying)銷(xiao)與(yu)銷(xiao)售(shou)(shou)、配送(song)與(yu)物流以及售(shou)(shou)后服(fu)務(wu)。公(gong)司(si)在(zai)瑞士證券交易所(suo)上市(shi)，在(zai)全球35個市(shi)場(chang)營(ying)運，擁有33,000名專業(ye)(ye)員(yuan)工(gong)， 2018年銷(xiao)售(shou)(shou)凈額為113億(yi)瑞士法郎(lang)(lang)。大(da)昌(chang)(chang)華(hua)(hua)嘉于1865年成立，憑(ping)借(jie)深厚(hou)的(de)瑞士傳統背景(jing)，公(gong)司(si)在(zai)亞(ya)洲開展業(ye)(ye)務(wu)歷史悠久， 深深植根于亞(ya)太(tai)地(di)(di)區的(de)社(she)會和企業(ye)(ye)界。大(da)昌(chang)(chang)華(hua)(hua)嘉科技事業(ye)(ye)部專注于為特(te)定的(de)行業(ye)(ye)應用領域提供(gong)全面的(de)解決方案。2018年該業(ye)(ye)務(wu)單(dan)元擁有1,220名員(yuan)工(gong)，凈銷(xiao)售(shou)(shou)額為4.121億(yi)瑞士法郎(lang)(lang)。
大(da)昌華(hua)嘉(jia)(jia)(jia)(大(da)昌洋行（上海）有(you)限公司)是一家專注于(yu)亞(ya)洲(zhou)地(di)區，在(zai)市場(chang)拓展服務(wu)領域處于(yu)領先地(di)位的集(ji)團。大(da)昌華(hua)嘉(jia)(jia)(jia)致力于(yu)幫助(zhu)其(qi)他公司和品牌拓展在(zai)消(xiao)費品、醫藥保健(jian)、特色原料、科技(ji)事業(ye)領域的業(ye)務(wu)。大(da)昌華(hua)嘉(jia)(jia)(jia)于(yu)1865年(nian)成立，憑借深厚的瑞(rui)士傳(chuan)統(tong)背景，公司在(zai)亞(ya)洲(zhou)開展業(ye)務(wu)歷史悠(you)久，深深植根于(yu)亞(ya)太地(di)區的社會和企業(ye)界(jie)。
大(da)昌華嘉儀(yi)器(qi)部專業(ye)(ye)提(ti)供分析儀(yi)器(qi)及(ji)設備，代理眾多(duo)(duo)歐美先進儀(yi)器(qi)，產品范(fan)圍包括(kuo)：顆粒，物(wu)理，化學，生化，通用(yong)實驗室(shi)的(de)各(ge)類分析儀(yi)器(qi)以及(ji)流程儀(yi)表設備，在(zai)中(zhong)國(guo)的(de)石化，化工，制藥，食(shi)品，飲(yin)料，農業(ye)(ye)科技等諸(zhu)多(duo)(duo)領域擁有(you)大(da)量用(yong)戶，具有(you)良好的(de)市(shi)場聲譽。我們(men)的(de)業(ye)(ye)務(wu)逐年增(zeng)加(jia)，市(shi)場不斷(duan)擴(kuo)大(da)。大(da)昌華嘉公司在(zai)中(zhong)國(guo)設有(you)多(duo)(duo)個銷售，服(fu)務(wu)網點，旨在(zai)為客戶提(ti)供全方位的(de)產品和服(fu)務(wu)。
一、樣品前處理
1、所用試劑
1.1 Loading Buffer：鋰鹽系(xi)統，pH 2.2
1.2 磺基(ji)水楊酸溶(rong)液：取50g磺基(ji)水楊酸溶(rong)于1L純水中
1.3 乙二胺(an)四乙酸二鈉溶(rong)液(ye)：取10g EDTA-Na溶(rong)于1L純水中
1.4 0.06mol/L 鹽(yan)(yan)酸(suan)(suan)：取50mL 鹽(yan)(yan)酸(suan)(suan)加水稀釋至(zhi)10mL,混勻(yun)
1.5 5種氨基(ji)酸標準品、Cystine單標
2、前處理設備
1) 分析天平:精(jing)度為(wei) 0.0001g
2) 移液槍及槍頭
3) 0.22um濾膜(mo)
4) 一次(ci)性(xing)注射器
5) 低范(fan)圍pH試紙(zhi)
3、樣品制備（參考NY/T 1975-2010）
因樣品為透明膠質(zhi)類物質(zhi)，且可(ke)能含有(you)未知大分子等雜質(zhi)，故需(參考NY/T 1975)進行除蛋白(bai)前處理(li)：
吸(xi)取2 mL樣品于10 mL離心(xin)管(guan)(guan)或試管(guan)(guan)中(zhong),準確(que)加(jia)人2 mL磺基水楊(yang)酸(suan)溶(rong)(rong)(rong)液(ye)(ye)(1.2)，混勻(yun)(yun),放置1h。準確(que)加(jia)入1 mL EDTA-Na溶(rong)(rong)(rong)液(ye)(ye)(1.3)和1 mL鹽酸(suan)溶(rong)(rong)(rong)液(ye)(ye)(1.4),混勻(yun)(yun),離心(xin)15 min(或用0.45um的(de)微孔(kong)濾(lv)膜(mo)過濾(lv))。吸(xi)取上清液(ye)(ye)(或濾(lv)液(ye)(ye))1 mL(測定(ding)當前pH，若有(you)需要則可(ke)加(jia)少許(xu)的(de)Loading Buffer (1.1),使(shi)氨基酸(suan)濃度處于儀器檢測范圍內)，移液(ye)(ye)槍(qiang)取上述溶(rong)(rong)(rong)液(ye)(ye)1mL至一(yi)次(ci)性注射劑，過濾(lv)膜(mo)，上機(ji)待測。
二、分(fen)析(xi)方法描述（Biochrom 30+）
氨基(ji)酸分析儀分析方法(fa)參數(shu)：
1) 色譜柱(zhu)：Biochrom Li型陽離子交換樹脂柱(zhu)，4.6*20cm
2) 分離(li)程序：
3) 運行時(shi)間：經分析(xi)時(shi)間+再(zai)生時(shi)間 168.15min
4) 反應(ying)單元溫(wen)度：135°C。
5) 檢(jian)測(ce)波長：570nm、440nm同時(shi)檢(jian)測(ce)。
三、樣品中氨基酸(suan)含量的計算(suan)
樣品測定液氨基酸的(de)含量按式(1)計算:
Ci = Cs/As × Ai× F ················· (1)式中:
Ci ———樣品測定液氨基酸i的含量,單位為納摩爾每毫升(nmol/mL);
Cs ———氨基酸標準工作液氨基酸s的含量,單位為納摩爾每毫升(nmol/mL);
Ai ———試樣測定液氨基酸i的峰面積;
As ———氨基酸標準工作液氨基酸s的峰面積;
F ———樣品稀釋倍(bei)數。
附：透明膠質類物質中，高溫滅菌前后比較的游離氨基酸，分析圖譜及做樣結果：
由(you)結果可知：高溫滅(mie)菌之后的游離氨基酸含(han)量，相較于滅(mie)菌前會有少許提升。這是由(you)于滅(mie)菌前的樣品中可能含(han)有的少許干擾物質或(huo)雜菌，存在經過高溫滅(mie)菌等(deng)的處理會被破(po)壞(huai)，釋放少許的氨基酸的可能，屬(shu)合理正常現象。
圖1. 樣品A--滅菌前—Tau、Glu、Gly、Val+Cystine
圖2. 樣品B--滅菌后—Tau、Glu、Gly、Val+Cystine
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